РЕАКТИВАЦІЯ РИБОНУКЛЕАЗ ПЕРИФЕРИЧНОЇ КРОВІ ЛЮДИНИ ПІСЛЯ СОРБЦІЇ НА НАНОПЛАСТИНКАХ LAPONITE®
DOI:
https://doi.org/10.15407/oncology.2023.04.302Ключові слова:
нанопластинки Lap, реактивація РНКаз, зимограмиАнотація
Мета: вивчити можливість реактивації рибонуклеаз (РНКаз) клітин периферичної крові хворих на колоректальний рак (КРР) після сорбції на нанопластинках Laponite® RD (Lap). Об’єкт і методи: у дослідженні використана клітинна суспензія периферичної крові хворих на КРР. Проби клітинних лізатів поєднували з 1% суспензією нанопластинок Lap, після чого проводили екстракцію РНКаз 0,25 н H2SO4, або 2% розчином додецилсульфату (ДДС) натрію. Для аналізу активності РНКаз використана методика зимограм. Результати: встановлено, що при зв`язуванні РНКаз з нанопластинками Lap утворюються комплекси з втратою ферментативної активності. Однак РНКаза може бути вивільнена з комплексу екстракцією 0,25 н H2SO4 або 2% розчином ДДС натрію. Але при екстракції 2% розчином ДДС натрію фермент здатен відновлювати ферментативну активність, у той час як при екстракції 0,25 н H2SO4 ферментативна активність втрачається незворотно. Висновок: екстрагована з нанопластинок Lap РНКаза може відновити свою активність, як ферменту, який каталізує розщеплення РНК та гібридні молекули РНК/ДНК, в залежності від способу екстракції.
Посилання
Peixoto D, Pereira I, Pereira-Silva M, et al. Emerging role of nanoclays in cancer research, diagnosis, and therapy. Coord Chem Rev 2021; 440: 213956. https://doi.org/10.1016/j.ccr.2021.213956.
Lee VT, Sondermann H, Winkler WC. Nano-RNases: oligo-or dinucleases? FEMS Microbiol Rev 2022; 46: fuac038. doi: 10.1093/femsre/fuac038.
Wang Y, Abrol R, Mak JYW, et al. Histone deacetylase 7: a signalling hub controlling development, inflammation, metabolism and disease. FEBS J 2023; 290: 2805–32. doi: 10.1111/febs.16437.
Stealey ST, Gaharwar AK, Zustiak SP. Laponite-based nanocomposite hydrogels for drug delivery applications. Pharmaceuticals 2023; 16 (6): 821. https://doi.org/10.3390/ph16060821.
Eller CH, Raines RT. Antimicrobial synergy of a ribonuclease and a peptide secreted by human cells. ACS Infect Dis 2020; 6 (11): 3083–8. doi: 10.1021/acsinfecdis.0c00594.
Artman M, Fry M, Engelberg H. The preparation and characterization of ribonucleic acid obtained by direct phenol extraction of intact cells of Escherichia coli from low ionic environment. Biochem Biophys Res Commun 1966; 25 (1): 49–53. doi: 10.1016/0006-291x(66)90638-3.
Samoylenko O, Korotych O, Manilo M, et al. Biomedical applications of laponite{textregistered}-based nanomaterials and formulations. In: Soft Matter Systems for Biomedical Applications. Bulavin L, Lebovka N (eds). Springer Nature, 2021, 385–452. doi:10.1007/978-3-030-80924-9_15.
Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227 (5259): 680–5. doi: 10.1038/227680a0.
Shlyakhovenko V, Samoylenko O. Photopolymerization with EDTA and riboflavin for proteins analysis in polyacrylamide gel electrophoresis. Protein J 2022; 41 (4–5): 438–43. doi: 10.1007/s10930-022-10068-3.
Ohgi K, Sand A, Takizawa Y, Jrie M. Purification of acid ribonucleases from bovine spleen. J Biochem 1988; 103 (2): 267–73. doi: 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a122259.
