РОЗРОБКА ТЕХНОЛОГІЇ ОТРИМАННЯ ПРЕПАРАТІВ ГЛУТАТІОНУ НА ОСНОВІ СКОНСТРУЙОВАНИХ АКТИВНИХ СУПЕРПРОДУЦЕНТІВ ЦЬОГО ТРИПЕПТИДУ У ДРІЖДЖІВ

Автор(и)

  • М.Т. Юрків Інститут біології клітини НАН України, Львів
  • О.О. Куриленко Інститут біології клітини НАН України, Львів
  • Р.В. Василишин Інститут біології клітини НАН України, Львів
  • К.В. Дмитрук Приватне акціонерне товариство «Ензим», Ладижин
  • Н.Б. Мартинюк Приватне акціонерне товариство «Ензим», Ладижин
  • В.В. Скороход Приватне акціонерне товариство «Ензим», Ладижин
  • А.А. Сибірний Інститут біології клітини НАН України, Львів

DOI:

https://doi.org/10.15407/scine11.05.053

Ключові слова:

глутатіон, дріжджі, Hansenula polymorpha, метаболічна інженерія.

Анотація

За допомогою метаболічної інженерії сконструйовано штам метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha з посиленою експресією генів GSH2, що кодує γ-глутамілцистеїнілсинтетазу, та MET4, що кодує транскрипційний активатор генів біосинтезу цистеїну (попередник синтезу глутатіону). Отриманий рекомбінантний штам характеризується підвищеною продуктивністю синтезу глутатіону порівняно із штамом дикого типу в лабораторних умовах. Було проведено оптимізацію синтезуглутатіону сконструйованого рекомбінантного штаму  H. polymorpha. Розроблено напівпромислову модель технології отримання глутатіону з використанням сконструйованого дріжджового штаму-продуцента.

Посилання

Penninckx M.J. A short review on the role of glutathione in the response of yeasts to nutritional, environmental, and oxidative stresses. Enzyme Microb Technol. 2000, 26: 737—742.

Pocsi I., Prade R., Penninckx M. Glutathione, Altruistic Metabolite in Fungi. Advances in Microbial Physiology. 2004, V. 49: 13—86.

Li Y., Wei G., Chen J. Glutatione: a review on biotechnological production. Applied Microbiology and Biotechnology. 2004: 305—315.

Gellisen G. Hansenula polymorpha — biology and applications. Weinheim: Wiley VCH; 2002.

Ubiyvovk V.M., Ananin V.M., Malyshev A.Y. et al. Оptimization of glutathione production in batch and fedbatch cultures by the wild-type and recombinant strains of the methylotrophic yeast Hansenula polymorpha DL-1. BMC Biotechnol. 2011, V.11: 8.

Sambrook J., Fritsh E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor, New York. 1989.

Faber K.N., Haima P., Harder W. et al. Highly-efficient electrotransformation of the yeast Hansenula polymorpha. Curr Genet. 1994, 25: 305—310.

Griffith O., Mulcahy R. The enzyme of glutathione synthesis: γ-glutamylcysteine synthetase. Advances in enzymology and related aress of molecular biology. 1999, V. 73: 209—267.

Grabek-Lejko D, Kurylenko O.O, Sibirny V.A. et al. Alcoholic fermentation by wild-type Hansenula polymorpha and Saccharomyces cerevisiae versus recombinant strains with an elevated level of intracellular glutathione. J. Ind. Microbiol Biotechnol. 2011, 38(11): 1853-9.

http://dx.doi.org/10.1007/s10295-011-0974-z

Taxis C., Knop M. System of centromeric, episomal, and integrative vectors based on drug resistance markers for Saccharomyces cerevisiae. BioTechniques. 2006, 40: 73—78.

Wang Z., Tan T., Song J. Effect of amino acids addition and feedback control strategies on the high-cell-density cultivation of Saccharomyces cerevisiae for glutathione production. Process Biochemistry. 2007, 42: 108—111.

##submission.downloads##

Опубліковано

2024-08-14

Як цитувати

Юрків, М., Куриленко, О., Василишин, Р., Дмитрук, К., Мартинюк, Н., Скороход, В., & Сибірний, А. (2024). РОЗРОБКА ТЕХНОЛОГІЇ ОТРИМАННЯ ПРЕПАРАТІВ ГЛУТАТІОНУ НА ОСНОВІ СКОНСТРУЙОВАНИХ АКТИВНИХ СУПЕРПРОДУЦЕНТІВ ЦЬОГО ТРИПЕПТИДУ У ДРІЖДЖІВ. Science and Innovation, 11(5), 53–60. https://doi.org/10.15407/scine11.05.053

Номер

Розділ

Research and Engineering Innovative Projects of the National Academy of Sciences of Ukraine